背景
病原微生物嚴重威脅海參等水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的健康,漁業(yè)生產(chǎn)中常用諸如氟苯尼考之類的抗生素應(yīng)對病原微生物(比如副溶血弧菌)的爆發(fā)。但是,施加抗生素時,養(yǎng)殖水體中諸如枯草芽孢桿菌之類的益生菌同時也會受到影響。另一方面,抗生素的濫用還有可能造成微生物抗藥性的形成。因此,合理使用抗生素對生態(tài)環(huán)境保護和漁業(yè)經(jīng)濟都具有重要意義。生產(chǎn)中,養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶優(yōu)化用量的常見方法是通過分析用藥效果來判斷,一般采用平板計數(shù)法觀察用藥后養(yǎng)殖水中的菌落總數(shù)是否回落到警戒水平以下。由于海參養(yǎng)殖水體常常含有大量、多種有機和無機顆粒及懸浮物,不可避免干擾肉眼計數(shù)準確性。此外,該操作較繁瑣,需要專業(yè)技術(shù)人員,且至少耗時20 h,反饋用藥效果信息較慢。
方法和結(jié)果
采用移液器將0.2 mL施加了梯度濃度抗生素氟苯尼考之后的養(yǎng)殖水分別直接加入預(yù)裝有1.8 mL選擇性液體培養(yǎng)基TCBS的一個檢測管中,檢測管插入電子微生物生長分析儀中,測定細菌的生長動力學(xué)曲線。結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著施加氟苯尼考濃度的增加,弧菌生長調(diào)整期有規(guī)律增加(圖1),意味著養(yǎng)殖水體中活性弧菌細胞逐漸降低。因此,可以根據(jù)弧菌是否降低到了警戒限制下選擇合適的抗生素用量。本方法操作簡便,無需專業(yè)技術(shù)人員,全部分析用時≤6 h,可以在養(yǎng)殖車間現(xiàn)場完成(圖2)。