背景
工業(yè)、農業(yè)、醫(yī)療等行業(yè)所使用的大量殺菌劑和抑菌劑不可避免會通過廢水排放、大氣沉降等途徑進入河流、湖泊、水庫、海洋等水域的沉積物中,有可能對沉積物中的微生物造成影響,破壞生態(tài)平衡。了解殺菌劑和抑菌劑在沉積物中對環(huán)境微生物的作用結果是進行環(huán)境風險評估活動的必要前提之一。傳統(tǒng)K-B紙片擴散、顯微鏡、平板計數、生物量測定、微量肉湯稀釋等方法被用于測定殺菌劑和抑菌劑在沉積物中對微生物的影響時,必需繁瑣的微生物分離、純化等前處理步驟,不僅效率低,而且主客觀誤差也在所難免。
高效測定方法、原理與先進性
微生物在沉積物中暴露于殺菌劑和抑菌劑之后,連同沉積物一起被移至預裝有液體培養(yǎng)基(根據具體細菌種類選擇培養(yǎng)基種類)的檢測管中。檢測管置入電子微生物生長分析儀測定通道中。在設定溫度下,存活的細菌利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)生長,過程中新陳代謝作用將大分子物質(如蛋白質、脂肪、碳水化合物等)轉化分解為導電性較好的小分子物質和離子,從而引起培養(yǎng)基導電能力的增加。電子微生物生長分析儀在線監(jiān)測培養(yǎng)基導電能力的變化,并實時報告反正弦型生長動力學曲線,從而充分地展示細菌生長調整期、加速期、對數期、減速期和穩(wěn)定期的詳細信息。如果殺菌劑和抑菌劑在沉積物中表現出抑菌/殺菌能力,隨著其濃度的增加,對應細菌生長動力學曲線的調整期增加;同時最大生長速率也可能會持續(xù)降低。未出現反正弦型生長動力學曲線,表明細菌生長被完全抑制或者殺死,對應的最低濃度值即為最小抑菌濃度(MIC)值。由于無需將微生物從沉積物樣品中分離出來,更無需純化步驟,本方法具有操作簡便、準確性好、自動化程度高、耗時少、重現性好等顯著特點。
測定程序